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熒光PCR凍干之氨基酸
2020-08-01
氨基酸是含有氨基和羧基的一類有機化合物的通稱。目前發現的天然氨基酸就有300多種，基本氨基酸也有二十個品鐘。氨基酸應用于食品行業、醫藥行業、化妝品行業等。氨基酸是常見的蛋白質保護劑之一。在冷凍過程中,低濃度的甘氨酸可通過抑制10或100mmol/L磷酸緩沖鹽結晶所致pH值的改變而阻止蛋白質藥物變性。無定型甘氨酸可阻止凍干過程中重組人生長激素的聚集;結晶型甘氨酸能升高成品的塌陷溫度,阻止因塌陷而引起的蛋白質藥物的破壞。常用的氨基酸類蛋白質保護劑有脯氨酸、谷氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸...熒光PCR凍干之DMSO
2020-07-27
二甲基亞砜（DMSO）是一種有機化合物，常溫下為無色無臭的透明液體，是一種吸濕性的可燃液體。具有高沸點、熱穩定性好、與水混溶的特性?？勺饔袡C溶劑、反應介質和有機合成中間體。也可用作合成纖維的染色溶劑、去染劑、染色載體,以及回收乙炔、二氧化硫的吸收劑。二甲基亞砜是一種既溶于水又溶于有機溶劑。廣泛用作溶劑和反應試劑，具有很高的選擇抽提能力。二甲基亞砜是如何應用的呢？下面簡單介紹下，DMSO是一種重要的滲透型細胞保護劑。培養液中DMSO濃度為10%時，細胞生長抑制率近100%；1&...熒光PCR凍干保護劑之甲酰胺
2020-07-26
甲酰胺是一種化合物，無色透明液體，略有氨味，是合成醫藥、香料、染料等的原料，也可作為溶劑用于合成纖維的抽絲、塑料加工、木質酪素墨水的生產等。通過甲酸甲酯和氨的反應制備甲酰胺的方法。甲酰胺是可作為溶劑、有機合成原料、醫藥原料等的在工業上有用的物質。甲酰胺是被較早發現并應用的PCR凍干保護劑之一，能促進引物模板退火，能提高PCR反應的特異性。分享下熒光PCR試劑凍干的示例：(1)將熒光PCR擴增緩沖液、引物、探針、熱啟動Taq酶、UNG酶、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、...熒光PCR凍干之PVP
2020-07-25
聚乙烯吡咯烷酮簡稱PVP,是一種非離子型高分子化合物，是N-乙烯基酰胺類聚合物中被研究得深、廣泛的精細化學品品種。應用于醫藥、化妝品、食品等行業?？勺稣澈蟿?、增溶劑、分散或共研磨劑、活性成分穩定劑等。PVP按其平均分子量大小分為四級，用K值表示，K值實際上是與PVP水溶液的相對粘度有關的特征值，而粘度又是與高聚物分子量有關的物理量，一般K值越大，其粘度越大，粘接性越強。熒光PCR凍干時，PVP能夠增強PCR產物生成量，其中PVP也能有效提高PCR效率和特異性。PVP作為PCR...熒光PCR凍干保護劑之蔗糖
2020-07-24
蔗糖是由葡萄糖和果糖通過異構體羥基縮合而成的非還原性二糖。蔗糖極易溶于水其溶解度隨著溫度的升高而增大。蔗糖的化學性質穩定，多呈無定型結構，對阻止蛋白質二級結構改變、凍干處理過程中，貯藏期內蛋白質的伸展和聚集起重要的作用。糖對蛋白質保護作用大小有時和其濃度有關，通常在某個濃度范圍內糖的保護作用隨著濃度的升高而增大；當達到某一濃度時保護作用達到大值，而此后再增大糖的濃度則保護效果不再顯著增加，有時反而會降低。在凍干時，其中蔗糖海藻糖等雙糖對一些蛋白質均能顯示出良好的保護作用，具備...熒光PCR凍干保護劑之海藻糖
2020-07-23
海藻糖又稱漏蘆糖、蕈糖等，是一種通過生物發酵技術從玉米、木薯等淀粉獲得的安全、可靠的天然糖類。海藻糖在食品以及醫藥生物制品方面等廣泛應用。海藻糖是怎么應用的呢？在食品中作為添加劑來改善干燥食品的質量和風味。在醫藥生物制品方面海藻糖因其具有高玻璃化轉變溫度和低吸濕性等特性，對實現蛋白等生物藥品的玻璃化凍結起重要作用，既是有效的低溫保護劑又是很好的凍干保護劑。海藻糖作為熒光PCR凍干保護劑的其中一種，在凍干中的應用：既能在冷凍過程中充當低溫保護劑，又能在干燥脫水過程中起到脫水保護...熒光定量PCR的優點
2020-07-21
普及一下熒光定量PCR的幾個優點：1、使用特異性探針對定量分子進行識別，具有很高的準確性。同時靶序列由引物和探針雙重控制，特異性好、假陽性低。2、熒光PCR檢測技術是綜合了PCR技術、熒光標記技術、激光技術、數碼顯象技術為一體的技術，因此檢測靈敏度高。3、熒光信號的產生和每次擴增產物成一一對應的關系，通過熒光信號的檢測可以直接對產物進行定量；定量范圍可在0－1010拷貝/毫升。4、擴增和檢測可以在同一管內檢測，一步完成，不需要開蓋，不易污染。5、速度快、高通量，可在2－3小時...熒光PCR凍干保護劑-叔丁醇
2020-07-19
叔丁醇被大家認為是適合制劑的凍干溶劑。有如下特點：凝固點高，純的叔丁醇在室溫下（25℃）就可以凍結。叔丁醇的蒸汽壓較高有利于升華，節省凍干時間。叔丁醇毒性低，在凍干過程中，大部分叔丁醇可在一次干燥階段升華，在制劑中殘留量很低。叔丁醇自身在凍結中形成針狀結晶，能改變溶質的結晶方式，利于升華。叔丁醇也可在熒光PCR試劑當凍干保護劑使用。叔丁醇起到加快凍干進程和改善凍干微觀結構的作用。凍干前的熒光PCR反應混合物原液中的濃度范圍為：叔丁醇的濃度為10%-40%（v/v）。熒光PCR...熒光PCR凍干保護劑篩選方法
2020-07-19
熒光PCR凍干體系篩選范圍:糖類、醇類、氨基酸類、聚合物類、大分子蛋白、無機鹽類等，其組分為其中的幾種的組合。優化方法：沒有經驗采用單一因素法，有一定經驗的采用多因素法。單一因素法篩選出保護效果比較好的保護劑，再將保護效果好的保護劑進行組合，產生終配方。因此，初步篩選采用單因素法，進一步篩選采用多因素法。我們不但能提供適合熒光PCR凍干的試劑凍干機Pilot10-15T，還能為用戶提供對藥品、診斷試劑、蛋白、多肽、酶、抗體、抗原等進行凍干工藝優化，包括保護劑優化、凍干曲線優化...熒光定量PCR實驗時的好方法
2020-07-18
實時熒光定量PCR技術實現了PCR從定性到定量的飛躍，具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，成為核酸分子定量的標準方法。在做熒光定量PCR實驗時建議使用這些耗材：96孔光學反應板配合光學膜，0.2ml光學八聯反應管配合光學膜，0.2ml光學八聯反應管配合平蓋的光學八聯管蓋等。在做熒光定量PCR實驗時有一些好的方法分享給大家，例如在使用單管或者8連管做實驗時，如果在樣本數量不多的時候，建議在樣品加熱塊（TRAY）上對稱的安放樣品，并且先放在第6列或者第7列...實時定量PCR之定量
2020-07-17
實時定量PCR不僅操作簡便、快速高效，而且具有很高的敏感性和特異性。廣泛地運用于分子生物學的各個領域。實時定量PCR在應用中有一些使用人對定量的方法上覺得存在著不容易克服的問題主要包括1.定量的方法與眾多因素有關，如水、緩沖液、儀器性能等，乃至于核酸的抽提過程都會影響到結果的穩定性。2.標準品的穩定保存很難獲得成功，高濃度的核酸物質易于被降解，而每次配制新的標準品又會增加批間差異。3.每次測定樣本都要同時測定標準品，而熱循環儀的樣本孔有限，所以在單批內不能測定更多的樣本，這樣...凍干熒光PCR試劑之反應管
2020-07-15
凍干熒光PCR試劑凍干方法是將熒光PCR試劑經過預凍，在真空狀態下進行升華，后可制備成凍干粉。凍干熒光PCR試劑時，選用的反應管在做凍干時有許多不足之處：1.由于反應管呈上寬下窄的錐字形，還需要借助其他工具支撐，這樣反應管試劑與凍干機擱板的接觸面積很小，升華時傳熱會受到限制，延長了預凍和升華的時間，反應管中的凍干程序一般在24～30小時，凍干制品日產量很低。2.反應管中的凍干，在加入凍干混合試劑后，需要進行離心處理，排出氣泡，并將粘附在反應管壁上的試劑離心下來。3.反應管中的...熒光定量PCR的效率值
2020-07-15
熒光定量PCR的效率值可通過標準曲線獲取。理想的反應效率為100%。效率較高（高于110%）一般說明反應過程中存在抑制作用。引起抑制作用的原因主要是RAN或者DNA質量較差，模板濃度過高及含有核酸鈍化的殘余物。反應效率較低（低于90%）的原因有試劑濃度不適（主要是引物、鎂、Taq、DNA、聚合酶、尤其是在多重試驗中）。造成效率低的其他因素有引物Tm之間的差異超過5℃或者是熱循環條件不適。抑制作用和較低的效率會影響分析的靈敏度，導致動態范圍減小及通用性降低。怎樣解決呢？可在做凍...淺談熒光PCR凍干芯片的方法
2020-07-14
熒光PCR凍干芯片的制備方法簡單快速，易于操作，縮短凍干所需時間，一般可在八小時內完成凍干步驟。熒光PCR凍干芯片的制備方法示例,1.先要稱取制備凍干保護劑如海藻糖、棉子糖、右旋糖酐、甘油、焦磷酸二乙酯處理過的水，置于容器中混合均勻，然后加熱至*溶解，在放入2～8℃冷卻。2.預混熒光定量PCR試劑如將PCR反應緩沖液、引物、探針、dNTPs和DNA聚合酶混合均勻；將預混的熒光定量PCR試劑和凍干保護劑混合均勻（體積比為3:1），制備成凍干試劑；取5～8μL的凍干試劑點在...熒光探針和熒光染料凍干防護
2020-07-12
凍干對熒光探針和熒光染料有防護作用，凍干可防止探針和染料降解，提高反應的靈敏度和特異性。接著介紹一下熒光探針和熒光染料的特性。熒光探針是PCR擴增時在加入一對引物的同時加入熒光探針，探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。熒光染料是在PCR...這就是單效外循環濃縮器的原理的吧,這篇文章讀完就感覺不錯
2020-07-09
單效外循環濃縮器對溶液進行蒸發濃縮時，在中藥提取、生物醫藥產品的提取過程中應用尤其之多。單效濃縮器應用于化工、醫藥、廢水處理行業中，批量小，品種多的真空濃縮過程中。單效外循環濃縮器原理是利用外加熱自然循環與真空負壓蒸發結合的方式，將溶液進行蒸發濃縮，將溶劑和溶液進行分離。生蒸汽進入加熱室，將料液加熱上升，從噴管噴入蒸發室，進行氣液分離，其料液從循環管回到加熱室下部再進行加熱，料液受熱后又噴入蒸發室開成循環。當進入的料液濃縮到一定程度，自控儀表檢測反饋后，由出料口出料，蒸發室蒸...中試凍干機制品升華干燥要點
2020-07-07
制品在凍干過程中的升華干燥，分為一次干燥和二次干燥。一次干燥的要點，當凍干箱內的壓力降到60Pa（根據制品特點而定）以下，就可以給制品加熱，為制品升華提供能量，制品升華的速度由加熱能力和冷阱的捕水能力而定。但凍干箱的壓力必須維持在允許的高壓力以下，板層的溫度在一次升華不要超過共溶點?？梢酝ㄟ^以下現象斷定一階段干燥結束：1.干燥層和凍結層的交界面到達瓶底并消失。2.產品溫度上升到接近板層的溫度。3.凍干箱的壓力且維持不變。上述現象發生后，至少再延長0.5~1小時，以*除制品中的...制藥凍干機的性能要求
2020-07-04
制藥凍干機要具備安全性、可靠性、適用性。在選擇制藥凍干機時要滿足以下幾點性能要求。1.凍干機箱體內部要采用大圓角設計，表面采用鏡面拋光，箱體底部采用傾角設計，要符合FDA及GMP要求。2.冷阱要采用外置盤管，冷阱內要光亮*，避免二次污染及交叉污染。3.要采用立式冷阱快速的熱水浸泡除霜，縮短間歇時間。4.干燥箱與冷阱要采用分體式結構，實現無菌隔離。5.系統密封性要好，極限真空度要≤1Pa。6.系統要有低溫進箱、二次回凍（反復預凍）、自動進氣和壓塞、低溫出箱的功能。7.要有...原位凍干機的特點及應用
2020-06-27
原位凍干機是介于小型實驗室凍干機和中試凍干機之間的一款機型。原位凍干機為立式，可原位預凍，減少凍干制品的污染，凍干速度快，捕水量大，0.2平米的原位凍干機凍干時間一般為15-18個小時。板層可獨立控溫，凍干制品的均一度較好，有全自動程序，可設置完整的凍干曲線，通過凍干曲線可隨時查詢溫度及真空度曲線。方便工藝優化及凍干驗證。選擇原位凍干機比較適合預算成本相對較低且性能又要高于小型實驗室凍干機的用戶。原位凍干機應用于食品、生物研究、化工、制藥、醫學等行業。博醫康原位凍干機Pilo...板層溫度及平整度的重要性
2020-06-22
在選用凍干機時板層溫度均勻性及平整度是重要因素之一。板層溫度均勻性和平整度越好，凍干樣品的質量也就越好。如生產型凍干機板層保持高平整度要求，尤其是大板層保持高平整度要求更難。板層制作常見的方法有:打孔塞焊法、L型焊法、真空釬焊法。這些方法都是成熟的板層制作方法。無論采用哪種制作方法，想保持板層內外平整，流道阻力小，都要付出高額的制作加工代價。同樣尺寸大小的一塊板層，高精度加工的成本是普通加工成本的十幾倍。這也是生產型凍干機造價高的原因之一。生產型凍干機LYO-15特點：箱體設...Copyright © 2018 中斯立孚（天津）生物技術有限公司 All Rights Reserved.
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